藍(lán)藻毒素合成蛋白McyF和家蠶保幼激素環(huán)氧水解酶的結(jié)構(gòu)研究
本文關(guān)鍵詞:農(nóng)業(yè)利用外資對(duì)江蘇省農(nóng)業(yè)經(jīng)濟(jì)增長(zhǎng)貢獻(xiàn)的研究,由筆耕文化傳播整理發(fā)布。
【摘要】由藍(lán)藻大量爆發(fā)引起的水華和赤潮是一個(gè)世界性的難題,其對(duì)環(huán)境的污染主要是通過制造并向水體中釋放各種毒素。微囊藻毒素是藍(lán)藻合成的眾多毒素中最常見也是危害最大的一類,主要由微囊藻屬、項(xiàng)圈藻屬、念珠藻屬和顫藻屬的藍(lán)細(xì)菌制造。微囊藻毒素的生物合成由位于同一個(gè)基因簇的一系列的毒素合成蛋白循序完成。我們解析了其中的一個(gè)重要蛋白,天冬氨酸消旋酶McyF與其底物L(fēng)-型天冬氨酸、D-型天冬氨酸和抑制劑檸檬酸各自的復(fù)合物晶體結(jié)構(gòu)。結(jié)構(gòu)分析和同源蛋白比對(duì)揭示了其底物結(jié)合口袋的一些結(jié)構(gòu)細(xì)節(jié)。這些發(fā)現(xiàn)增加了我們對(duì)于McyF的底物結(jié)合和催化機(jī)制的理解,并可能對(duì)生物方法抑制毒素合成有所幫助。保幼激素是調(diào)節(jié)昆蟲變態(tài)發(fā)育的一種重要激素,保幼激素環(huán)氧水解酶(JHEH)是保幼激素降解通路上的一個(gè)關(guān)鍵蛋白。我們解析了家蠶保幼激素環(huán)氧水解酶的2.30A的晶體結(jié)構(gòu)。其整體結(jié)構(gòu)由一個(gè)N端片段,一個(gè)水解酶區(qū)域和一個(gè)插入水解酶區(qū)域中的lid區(qū)構(gòu)成。結(jié)構(gòu)分析和分子模擬顯示其底物結(jié)合口袋有一些保守并且獨(dú)有的特征。這些發(fā)現(xiàn)增加了我們對(duì)微粒體環(huán)氧水解酶的底物識(shí)別和催化機(jī)制的理解,并且為以后保幼激素衍生的殺蟲劑的設(shè)計(jì)提供了結(jié)構(gòu)依據(jù)。蠶絲是自然界最引人注目的生物材料之一。蠶絲主要由絲心蛋白和絲膠蛋白組成,這兩類蛋白都由家蠶的絲腺合成和分泌,在絲腺腔中混合裝配后,從蠶的吐絲口噴出形成蠶絲。關(guān)于蠶絲的裝配機(jī)制一直是蠶學(xué)家們研究的熱點(diǎn)和難點(diǎn)。絲心蛋白由3種蛋白組成:絲心蛋白重鏈、絲心蛋白輕鏈和糖蛋白P25。我們通過串聯(lián)表達(dá)的方法獲得了絲心蛋白輕鏈與重鏈C端復(fù)合體蛋白,并使用圓二色譜和動(dòng)態(tài)光散射檢測(cè)其理化狀態(tài)。絲心蛋白輕鏈與重鏈C端復(fù)合體在溶液中的狀態(tài)與重鏈N端不同,它以二體形式存在,且其二級(jí)結(jié)構(gòu)不隨pH變化而改變。這些研究成果為我們進(jìn)一步研究蠶絲的結(jié)構(gòu)和裝配機(jī)制提供了基礎(chǔ)。
【作者】周康;
【導(dǎo)師】周叢照;陳宇星;
【作者基本信息】中國(guó)科學(xué)技術(shù)大學(xué),生物化學(xué)與分子生物學(xué),2014,,博士
【關(guān)鍵詞】藍(lán)細(xì)菌;微囊藻毒素;天冬氨酸消旋酶;家蠶;保幼激素環(huán)氧水解酶;蠶絲;絲心蛋白輕鏈;絲心蛋白重鏈;晶體結(jié)構(gòu);
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本文編號(hào):114611
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