西瓜噬酸菌越冬能力及兩菌群在同一寄主定殖動態(tài)差異研究
本文關(guān)鍵詞:西瓜噬酸菌越冬能力及兩菌群在同一寄主定殖動態(tài)差異研究 出處:《沈陽農(nóng)業(yè)大學(xué)》2016年博士論文 論文類型:學(xué)位論文
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【摘要】:西瓜細菌性果斑病(Watermelon bacterial fruit blotch)是世界范圍廣泛分布的西、甜瓜細菌性病害,病原菌為西瓜噬酸菌(Acidovorax citrulli, Aac)。該病原菌可侵染西瓜和甜瓜等多種葫蘆科作物,侵染植株或種子,可引起寄主發(fā)病,進而造成嚴重的經(jīng)濟產(chǎn)量損失。病原菌特性及生存特征是防治該病害的基礎(chǔ)。本論文以西瓜噬酸菌為對象,研究其越冬能力;利用第二代測序技術(shù)對西瓜噬酸菌亞群Ⅰ菌株和亞群Ⅱ菌株進行基因組測序及組裝;通過定量分析研究西瓜噬酸菌亞群Ⅰ菌株和亞群Ⅱ菌株在西、甜瓜植株組織上的定殖動態(tài)差異;對新發(fā)現(xiàn)的1株解淀粉芽孢桿菌進行鑒定和驗證性試驗,同時檢測該菌株對西瓜噬酸菌的室內(nèi)抑菌活性及其對兩個亞群菌株的防效差異。本文研究內(nèi)容為科學(xué)有效的防控西瓜細菌性果斑病提供了重要的科學(xué)理論依據(jù)和技術(shù)支撐。主要研究結(jié)果如下:1.以西瓜噬酸菌野生菌株Aac-5為研究對象,測定西瓜噬酸菌在不同低溫條件及各地區(qū)不同地表深度的黃土和花卉土中的存活能力。經(jīng)過對不同條件處理的土壤進行分離回收培養(yǎng),平板計數(shù)法統(tǒng)計菌落數(shù)量,將結(jié)果進行比較分析得出:西瓜噬酸菌可在4℃、-20℃、-50℃下存活,在各地區(qū)的地表、地下10 cm及地下20 cm處均可越冬存活;總體西瓜噬酸菌在花卉土中的存活量高于在黃土中的存活量;西瓜噬酸菌在南方地區(qū)的越冬存活量高于在北方地區(qū)的越冬存活量,相應(yīng)回收到的西瓜噬酸菌的致病力也相對強于北方地區(qū)處理后回收菌株的致病力。2.利用第二代測序技術(shù),Illumina公司的Miseq 2000平臺對西瓜噬酸菌亞群Ⅰpslb65菌株和亞群Ⅱ pslbtw6菌株的全基因組進行測序并拼接組裝,最終得出西瓜噬酸菌亞群Ⅰpslb65菌株為一個4903,443 bp的環(huán)狀染色體,共包含4532個ORF,基因編碼率為88.61%,GC含量平均為68.8%,其中注釋到54個RNA;西瓜噬酸菌亞群Ⅱpslbtw6菌株為一個5080,614 bp的環(huán)狀染色體,共包含4759個ORF,基因編碼率為88.41%,GC含量平均為68.7%,其中注釋到51個RNA;西瓜噬酸菌亞群Ⅰ pslb65菌株與Ⅰ組測序菌株M6進化關(guān)系近,分于一組。3.在溫室條件下,用標記GFP的亞群Ⅰ pslb3菌株和亞群Ⅱ pslbtw43菌株接種西、甜瓜種子,播種后定期回收下胚軸、根、莖稈、子葉和葉片,分離回收西瓜噬酸菌并用平板計數(shù)法統(tǒng)計菌落數(shù)量。結(jié)果表明亞群Ⅰ pslb3菌株和亞群Ⅱpslbtw43菌株均可在西、甜瓜各組織中定殖,在子葉上的定殖能力最強,在葉片上的定殖能力最弱。亞群Ⅰ pslb3菌株在甜瓜組織中的定殖能力強于亞群Ⅱ pslbtw43菌株,而亞群Ⅱ pslbtw43菌株在西瓜組織中的定殖能力強于亞群Ⅰ pslb3菌株。4.分離篩選出1株對西瓜噬酸菌有拮抗功能的生防菌株,經(jīng)鑒定該菌株為解淀粉芽孢桿菌,命名為JD001。通過室內(nèi)抑菌試驗驗證了其對西瓜噬酸菌有較好的抑制效果。同時測定了JD001菌株分別對西瓜噬酸菌兩個亞群菌株的抑制效果及其在西、甜瓜植株上對西瓜噬酸菌兩個亞群菌株的防效比較,得出菌株JD001對西瓜噬酸菌亞群Ⅰ pslb3菌株和亞群Ⅱ pslbtw43菌株均有較好的室內(nèi)抑菌效果,在西瓜植株上對亞群Ⅰ pslb3菌株的防治效果高于對亞群Ⅱ pslbtw43菌株的防效,而在甜瓜植株上對亞群Ⅱ pslbtw43菌株的防效高于對亞群Ⅰ pslb3菌株的防治效果。
[Abstract]:......
【學(xué)位授予單位】:沈陽農(nóng)業(yè)大學(xué)
【學(xué)位級別】:博士
【學(xué)位授予年份】:2016
【分類號】:S436.5
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,本文編號:1438289
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