本文關鍵詞：游泳運動對非酒精性脂肪肝大鼠心肌細胞自噬的影響

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【摘要】：目的:探討有氧運動對非酒精性脂肪肝(NAFLD)大鼠心肌細胞自噬水平的影響及可能的機制。方法:8周齡雄性SD大鼠50只,隨機分為空白對照組(n=20)和NAFLD模型組(n=30),空白對照組飼以標準普通飼料,模型組飼以高脂飼料。實驗第8周,對照組和模型組各隨機取10只,依次標記為C8組和M8組,做肝臟病理切片以及檢測血液生化指標,確定NAFLD模型成功后,將余下模型組隨機分為:16周模型組(M16組,n=10)和運動模型組(EM組,n=10),對照組剩余10只編為16周空白對照組(C16組,n=10)。C16組繼續(xù)飼以標準普通飼料,M16組和EM組繼續(xù)飼以高脂飼料,EM組給予無負重有氧游泳運動(60min/d、6d/w、8w)至第16周實驗結束。全自動生化分析儀檢測大鼠血清TG、TC、ALT和AST的含量。HE染色光鏡下觀察肝臟的脂肪變性情況。透射電鏡下觀察心肌的超微結構。ELISA法測心肌游離脂肪酸(FFA)、丙二醛(MDA)、過氧化物歧化酶(SOD)和腫瘤壞死因子-α(TNF-α)。Western-blot法測心肌Beclin-1和核因子-κB(NF-κB)蛋白表達。結果:1.C8組未見明顯肝細胞脂肪變性,M8組10只中有8只發(fā)現(xiàn)肝細胞脂肪變性,與C8組比較,M8組肝細胞脂肪變積分顯著增加。C16組和M16組肝細胞脂性變程度較第8周明顯加重。C16組10只大鼠中,僅2只可見肝細胞內少量脂肪性變;M16組10只大鼠全部肝細胞脂肪變性明顯;EM組9只中6只可見肝細胞脂肪變性。M16組和EM組肝細胞脂性變積分明顯高于C16組;與M16組比較,EM組肝細胞脂性變積分降低。2.與C8組比較,M8組大鼠血清AST、ALT、TC及TG含量顯著升高。與C16組比較,M16組大鼠血清AST、ALT、TC及TG含量均顯著增加;EM組大鼠血清AST、ALT、TC及TG含量均明顯低于M16組。3.電鏡下觀察,M16組心肌部分線粒體腫脹,嵴稀且短,視野下未見自噬雙層膜。EM組心肌細胞核結構正常,線粒體結構較完整但出現(xiàn)部分嵴稀、腫脹,視野下可見自噬囊泡吞噬內容物。4.M16組心肌MDA和TNF-α含量顯著高于C16組,SOD含量顯著降低;與M16組相比,EM組心肌FFA、MDA和TNF-α含量降低,SOD含量升高,但無顯著性差異。5.M16組心肌NF-κB相對表達量顯著高于C16組和EM組。M16組心肌Beclin-1相對表達量明顯低于C16組;與M16組比較,EM組心肌Beclin-1相對表達量顯著升高。結論:1.8周高脂飲食可致80%SD大鼠發(fā)生NAFLD,其病變程度隨時間延長而加重;2.16周高脂飲食導致NAFLD大鼠心肌細胞自噬水平降低,心肌細胞損傷加重;3.8周游泳運動能夠提高NAFLD大鼠心肌細胞自噬水平,減輕心肌細胞損傷,提示有氧運動對減輕NAFLD的心肌細胞損傷有積極作用。
【關鍵詞】：游泳運動 非酒精性脂肪肝 心肌 自噬 Beclin-1
【學位授予單位】：成都體育學院
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2016
【分類號】：G861.1;G804.2
【目錄】：

• 摘要4-6
• Abstract6-10
• 英文縮寫中英文對照表10-11
• 1 前言11-13
• 1.1 選題依據(jù)11-12
• 1.2 研究內容12-13
• 1.3 技術路線13
• 2 文獻綜述13-20
• 2.1 非酒精性脂肪肝13-14
• 2.2 非酒精性脂肪肝的發(fā)病機制14-15
• 2.3 非酒精性脂肪肝與心肌細胞損傷15-19
• 2.3.1 異位脂質沉積15
• 2.3.2 氧化應激與脂質過氧化15-16
• 2.3.3 炎癥反應16-17
• 2.3.4 細胞自噬異常17-19
• 2.4 運動干預19-20
• 2.4.1 有氧運動對非酒精性脂肪肝病的保護作用19
• 2.4.2 有氧運動對心肌細胞自噬的調控作用19-20
• 3 材料與方法20-29
• 3.1 動物分組與處理20-21
• 3.1.1 實驗對象20
• 3.1.2 實驗對象造模及分組20-21
• 3.1.3 膳食控制和運動方案21
• 3.2 樣本采集與保存21-22
• 3.3 實驗儀器與試劑22-25
• 3.3.1 主要實驗儀器22-23
• 3.3.2 主要試劑23
• 3.3.3 主要試劑配方23-25
• 3.4 指標測試與方法25-29
• 3.4.1 基礎指標測試25
• 3.4.2 肝組織HE染色病理學檢查25
• 3.4.3 透射電子顯微鏡觀察心肌細胞損傷25-26
• 3.4.4 ELISA法測定心肌FFA、MDA、SOD和TNF α 的含量26-27
• 3.4.5 Western blot法測定心肌Beclin 1 和NF κB蛋白表達27-29
• 3.5 統(tǒng)計學分析29
• 4. 結果29-41
• 4.1 實驗干預對各組大鼠體重的影響29-31
• 4.2 各組大鼠肝臟組織形態(tài)學變化31-36
• 4.2.1 肉眼觀察31-33
• 4.2.2 光學顯微鏡下觀察肝臟組織HE染色病理切片33-36
• 4.3 各組大鼠血清ALT、AST、TC及TG含量變化36-37
• 4.4 各組大鼠心肌FFA、SOD、MDA和TNF-α 含量變化37-38
• 4.5 各組大鼠心肌超微結構電鏡觀察結果38-40
• 4.6 各組大鼠心肌Beclin-1 和NF-κB蛋白表達變化40-41
• 5 分析與討論41-47
• 5.1 NAFLD大鼠模型的建立分析41-42
• 5.2 有氧運動對NAFLD大鼠體重、血清AST、ALT、TC以及TG的影響 .42-43
• 5.3 有氧運動對NAFLD大鼠心肌細胞FFA、SOD、MDA、TNF-α 含量和NF-κB蛋白表達量的影響43-44
• 5.4 有氧運動對NAFLD大鼠心肌Beclin-1 蛋白表達量的影響44-47
• 6 小結47-48
• 7 參考文獻48-56
• 致謝56-57
• 在讀期間發(fā)表的學術論文與研究成果57

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本文編號：934369