目的:通過阻斷Omi/HtrA2,探究Omi/HtrA2對大鼠骨骼肌LC3的影響,明確Omi/HtrA2在骨骼肌自噬中的作用。方法:8周齡雄性大鼠88只隨機分為對照組(C,n=8)、安慰劑組(D,n=40)、抑制劑組(U,n=40)。安慰劑組注射相對量的DMSO溶液,抑制劑組注射Omi/HtrA2特異性抑制劑Ucf-1。干預(yù)后0h、12h、24h、48h和72h取材。免疫熒光技術(shù)觀測LC3位置及表達(dá)量;Western Blot檢測比目魚肌LC3II/I的蛋白表達(dá)。結(jié)果:大鼠骨骼肌細(xì)胞LC3熒光強度量,D組與C組無顯著性差異,阻斷Omi/HtrA2后出現(xiàn)一過性降低,其中12 h至24 h時間點降至最低;LC3II/I的蛋白表達(dá)出現(xiàn)相同趨勢。結(jié)論:(1)阻斷Omi/HtrA2可抑制LC3II/I表達(dá);(2)12 h至24 h是Omi/HtrA2阻斷劑發(fā)揮作用的關(guān)鍵時間段。

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【文章目錄】：
1 研究對象與方法
    1.1 研究對象
    1.2 研究方法
        1.2.1 免疫熒光技術(shù)檢測骨骼肌細(xì)胞LC3定位（LC3單染）
        1.2.2 Western Blot方法測定LC3II/I的蛋白含量。
    1.3 統(tǒng)計方法
2 結(jié)果與分析
    2.1 阻斷Omi/Htr A2對大鼠骨骼肌細(xì)胞LC3定位的影響
    2.2 阻斷Omi/Htr A2對大鼠骨骼肌細(xì)胞LC3蛋白表達(dá)的影響
3 討論分析



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