本文選題：8-羥基鳥嘌呤 + 小鼠骨骼肌成肌細胞��； 參考：《吉林大學》2017年碩士論文

【摘要】：骨骼肌占人體體重的40%,其在運動、呼吸、動作維持、體溫調節(jié)、代謝調節(jié)等功能中有著不可替代的作用。肌肉生成是一系列復雜而精細的過程,主要由四個方面,即活化肌肉干細胞、肌細胞增殖分化、形成肌細胞、細胞相互融合繼而形成多核的肌管。大負荷的運動促使骨骼肌生成活性氧,其可促進骨骼肌肌肉生成,但是直接的證據(jù)很少。本文探究運動產(chǎn)生的8-羥鳥嘌呤對小鼠骨骼肌成肌細胞C2C12增值分化的影響。首先進行分組訓練,一組為安靜組,一組為進行下坡跑運動的運動組,運動組保持其運動速度為16m/min,運動坡度為-16o,運動的時間為持續(xù)100分鐘運動,5分鐘休息,再運動100分鐘,實驗結果通過免疫組化的方法,驗證運動與氧化損傷的正相關性,在此基礎之上,基于C2C12增值分化模型,通過有無添加8-羥鳥嘌呤,建立刺激組和未加刺激組。顯微鏡觀察各時期細胞形態(tài),計算各時期細胞數(shù);通過實驗,檢測相關成肌分子MyoD、M-Cadherin和MyoG在mR NA方面的表達水平。通過研究得出以下結論:1.通過進行免疫組化實驗,發(fā)現(xiàn)運動組的實驗動物骨骼肌產(chǎn)生大量的8-oxo G,表明大負荷運動下,骨骼肌產(chǎn)生的運動損傷程度較為嚴重。2.通過對刺激組和未加刺激組的兩組細胞進行細胞計數(shù)、發(fā)現(xiàn)了刺激組和未加刺激組在細胞密度為80%時,刺激組細胞產(chǎn)生的分裂相較之未加刺激組明顯增多(P0.01),這說明了運動產(chǎn)生的8-oxoG能明顯地促進骨骼肌細胞的增殖。3.通過對刺激組和未加刺激組的細胞進行RT-PCR,發(fā)現(xiàn)了刺激組在加入刺激物8-oxoG后,對應的三種成肌分子MyoD、M-Cadherin和MyoG的mRNA表達明顯增強(P0.05),這些說明了運動產(chǎn)生的8-oxoG對骨骼肌成肌細胞的分化具有顯著地促進作用。
[Abstract]:Skeletal muscle accounts for 40% of body weight, which plays an irreplaceable role in the functions of exercise, respiration, movement maintenance, thermoregulation, metabolic regulation, and so on. Muscle generation is a series of complex and fine processes, which mainly consist of four aspects, namely, activating muscle stem cells, proliferating and differentiation of muscle cells, forming myocytes, and forming multicore cells to form each other. Myotubes. Heavy load movement causes skeletal muscle to produce reactive oxygen species, which can promote skeletal muscle formation, but there is little direct evidence. This article explores the effect of 8- hydroxyguanine on the C2C12 increment and differentiation of skeletal myoblasts in mice. First, group training, a group of quiet groups, and a group for downhill running In the dynamic group, the movement group keeps its speed of 16m/min, the motion slope is -16o, the time of the movement is 100 minutes, 5 minutes rest and then 100 minutes. The experimental results verify the positive correlation between the movement and the oxidative damage through the immunohistochemical method. On this basis, it is based on the C2C12 value-added differentiation model, through the addition of 8- hydroxyl birds Purine, set up the stimulation group and the non stimulation group. The cell morphology of each period was observed by microscope and the number of cells in each period was calculated. Through the experiment, the expression level of MyoD, M-Cadherin and MyoG in mR NA was detected. Through the study, the following conclusions were obtained: 1. by the immunohistochemical experiment, the skeletal muscle production of the experimental animals was found. A large number of 8-oxo G showed that the degree of motor damage caused by skeletal muscle was more serious under the heavy load movement, and.2. was counted by the cell count of two groups of cells in the stimulation group and the non stimulation group. It was found that when the cell density was 80% in the stimulation group and the non stimulation group, the cells produced by the stimulation group were significantly more than those in the non stimulation group (P0.01 This shows that the 8-oxoG produced by the exercise can obviously promote the proliferation of skeletal muscle cells through the RT-PCR of the cells in the stimulation group and the non stimulation group. It is found that after the stimulation of 8-oxoG, the corresponding three kinds of myoblasts, MyoD, M-Cadherin and MyoG, are obviously enhanced (P0.05). These indicate the 8-o of the movement generated 8-o. XoG has a significant effect on the differentiation of skeletal myoblasts.
【學位授予單位】：吉林大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2017
【分類號】：G804.2

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