【摘要】：目的了解上海交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬新華醫(yī)院耐碳青霉烯類肺炎克雷伯菌(CRKP)的耐藥機制、流行趨勢及臨床特點。為CRKP院內(nèi)感染預(yù)防控制提供理論依據(jù),并指導(dǎo)臨床合理使用抗生素。方法1.收集2009年-2013年我院臨床標本中分離到的CRKP,采用Vitek-2Compact全自動微生物分析系統(tǒng)聯(lián)合紙片擴散法(K-B法)進行藥敏試驗;2.用改良Hodge試驗及亞胺培南/亞胺培南-EDTA金屬酶抑制試驗(IP/IPI E-test)進行碳青霉烯酶及金屬酶表型篩查;3.PCR方法及基因測序檢測碳青霉烯酶、AmpC酶及ESBLs酶基因;4.采用SDS-PAGE檢測外膜蛋白的表達情況;5.對產(chǎn)碳青霉烯酶菌株進行質(zhì)粒轉(zhuǎn)移接合試驗;6.對外科重癥監(jiān)護室(SICU)進行環(huán)境標本采樣并篩選CRKP;7.采用多位點序列分型(MLST)及脈沖場凝膠電泳(PFGE)方法對臨床標本及環(huán)境樣本分離到的CRKP進行基因分型,并結(jié)合患者的臨床資料探討我院CRKP的分子流行病學(xué)特點。結(jié)果1.2009年-2013年期間共收集了84株分離自臨床標本的CRKP。2.72株改良Hodge試驗陽性,1株IP/IPI E-test試驗陽性。3.PCR及測序結(jié)果顯示72株改良Hodge試驗陽性的菌株中有69株攜帶KPC-2基因,2株攜帶IMP-4基因,1株攜帶NDM-1基因,上述菌株還同時攜帶1~3種ESBLs基因。12株改良Hodge試驗陰性的菌株僅攜帶DHA-1基因和/或1~2種ESBLs基因。4.84株CRKP中5株外膜蛋白表達正常,3株缺失Ompk36,1株缺失Ompk35,其余75株存在外膜蛋白變異。5.4株產(chǎn)碳青霉烯酶肺炎克雷伯菌轉(zhuǎn)移接合試驗成功。6.SICU的環(huán)境樣本中共篩選出2株CRKP。7.MLST結(jié)果顯示我院CRKP臨床分離株主要為ST11型(73/84),其次為ST323型(3/84),同時還檢出ST29,ST37,ST571,ST1696,ST1721,ST1722,ST1723和ST1725型各1株,后5種類型為首次發(fā)現(xiàn)的新ST型。PFGE將84株菌分為A(A1、A2、A3、A4)、B(B1、B2、B3、B4)、C(C1、C2)三個群,B3型菌株流行范圍最廣,分型結(jié)果與MLST相吻合。環(huán)境樣本中分離到的2株CRKP屬于B3型,也屬于ST11型。結(jié)論我院CRKP對碳青霉烯類抗生素的耐藥機制以產(chǎn)KPC-2酶合并外膜蛋白異常表達為主。ST11型(B3型)肺炎克雷伯菌在我院存在爆發(fā)流行,CRKP感染患者及其接觸過的物品為其重要的傳染源。需加強院內(nèi)感染預(yù)防控制措施,防止CRKP流行范圍的進一步擴大。
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【學(xué)位授予單位】：上海交通大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號】：R446.5;R440

【參考文獻】

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本文編號：2488656