【摘要】：目的構(gòu)建肺炎克雷伯菌rcs B基因缺失的無痕突變株和回補株,通過對突變株的超粘性和生物膜表型進行分析,探討轉(zhuǎn)錄調(diào)控子Rcs B對細菌超粘性和生物膜形成能力的影響。方法首先構(gòu)建突變株Δrcs B,PCR擴增rcs B基因上下游同源臂片段,克隆到質(zhì)粒p KO3-Km上,將重組質(zhì)粒導入肺炎克雷伯菌NTUH-K2044中,經(jīng)同源重組后篩選得到無痕突變株。然后構(gòu)建回補株,擴增rcs B基因片段,克隆到質(zhì)粒p BAD33上,將重組質(zhì)粒導入突變株Δrcs B中,得到回補株。測定野生株、突變株、回補株的超粘性和生物膜形成能力。結(jié)果成功構(gòu)建rcs B基因缺失的無痕突變株Δrcs B和回補株C-Δrcs B。與野生株相比,突變株超粘性和生物膜形成能力均減弱,回補株介于野生株和突變株之間。結(jié)論轉(zhuǎn)錄調(diào)控子Rcs B對肺炎克雷伯菌超粘性和生物膜形成具有正向調(diào)控作用。
[Abstract]:Objective to construct the scarless mutant and complement strain of Klebsiella pneumoniae rcs B gene deletion. By analyzing the hyperviscosity and biofilm phenotype of the mutant, the effect of transcription regulator Rcs B on bacterial hyperviscosity and biofilm formation was studied. Methods the upstream and downstream homologous arm fragments of rcs B gene were amplified by 螖 rcs BG-PCR and cloned into plasmid p KO3-Km. The recombinant plasmid was introduced into NTUH-K2044 of Klebsiella pneumoniae. After homologous recombination, trace free mutant was obtained. Then, the complement strain was constructed, the fragment of rcs B gene was amplified and cloned into plasmid p BAD33. The recombinant plasmid was introduced into the mutant 螖 rcs B and the complementary strain was obtained. The hyperviscosity and biofilm formation ability of wild, mutant and compensatory strains were determined. Results the trace free mutant 螖 rcs B and the complement strain C- 螖 rcs B were successfully constructed. Compared with the wild strain, the superviscosity and biofilm formation ability of the mutant were weakened, and the compensatory strain was between the wild and the mutant. Conclusion Transcriptional regulator Rcs B can positively regulate the hyperviscosity and biofilm formation of Klebsiella pneumoniae.
【作者單位】： 重慶醫(yī)科大學公共衛(wèi)生與管理學院醫(yī)學與社會發(fā)展研究中心健康領(lǐng)域社會風險預(yù)測治理協(xié)同創(chuàng)新中心;
【基金】：國家自然科學基金(31200064,31071093,31170129)~~
【分類號】：R446.5

【相似文獻】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 黃忠強;肺炎克雷伯菌的藥敏結(jié)果分析[J];廣西預(yù)防醫(yī)學;2001年04期

2 萬珊;費櫻;楊煥婕;劉寶;;1051株臨床肺炎克雷伯菌的藥敏分析[J];中華醫(yī)院感染學雜志;2011年20期

3 雷德龍,沈源;134株肺炎克雷伯菌的分離與藥敏分析[J];上海醫(yī)學檢驗雜志;1997年04期

4 葉楊芹,馬佳毓,付英梅,張文莉,趙月輝;脈沖凝膠電泳技術(shù)在肺炎克雷伯菌分型中的應(yīng)用[J];中國衛(wèi)生檢驗雜志;2002年04期

5 盛清;社區(qū)獲得性肺炎克雷伯菌菌血癥:臨床類型的全球性差異[J];國外醫(yī)學(流行病學傳染病學分冊);2002年03期

6 諸葛石養(yǎng),鐘毓娟,林慧,蒙保山,韋維;98例肺炎克雷伯菌的臨床分布及藥敏分析[J];右江民族醫(yī)學院學報;2003年01期

7 梁元吉;;老年下呼吸道感染患者肺炎克雷伯菌和大腸埃希菌耐藥性分析[J];中國醫(yī)學文摘.內(nèi)科學;2003年06期

8 熊一平,余顯書,曹何,胥飚;147株肺炎克雷伯菌引起醫(yī)院感染調(diào)查和藥敏結(jié)果分析[J];重慶醫(yī)學;2004年02期

9 褚斌斌,楊珊明,鄔碩平,張素惠;188株肺炎克雷伯菌的抗菌藥物敏感試驗分析[J];現(xiàn)代實用醫(yī)學;2005年08期

10 唐惠君;;肺炎克雷伯菌的藥敏解析[J];職業(yè)與健康;2006年05期

相關(guān)會議論文 前10條

1 萬珊;費櫻;楊煥婕;劉寶;;1051株臨床肺炎克雷伯菌藥敏分析[A];中國醫(yī)院協(xié)會第十八屆全國醫(yī)院感染管理學術(shù)年會論文資料匯編[C];2011年

2 王德春;王瑞蓮;;196株肺炎克雷伯菌藥敏分析[A];第十屆全軍檢驗醫(yī)學學術(shù)會議論文匯編[C];2005年

3 劉玲瓏;毛文祥;丁汀;;臨床分離肺炎克雷伯菌體外耐藥的動態(tài)觀察[A];應(yīng)對突發(fā)公共衛(wèi)生事件論壇論文集[C];2005年

4 廖維維;呂火祥;胡慶豐;沈蓓瓊;袁武鋒;;尿液中分離出菌落形態(tài)完全變異的肺炎克雷伯菌[A];2008年浙江省檢驗醫(yī)學學術(shù)年會論文匯編[C];2008年

5 陳建江;陳國英;;住院患者分離的肺炎克雷伯菌耐藥性和流行狀況分析[A];2011年浙江省檢驗醫(yī)學學術(shù)年會論文匯編[C];2011年

6 馬峻;樊毅;江麗萍;詹學峰;;肺結(jié)核患者感染肺炎克雷伯菌藥敏分析[A];中華醫(yī)學會第七次全國中青年檢驗醫(yī)學學術(shù)會議論文匯編[C];2012年

7 程科萍;王少康;孔慶芳;孔璐;孫桂菊;張徐軍;;新生兒重癥監(jiān)護病房4例肺炎克雷伯菌感染暴發(fā)分析[A];中國醫(yī)院協(xié)會第十八屆全國醫(yī)院感染管理學術(shù)年會論文資料匯編[C];2011年

8 陳敏;朱張國;沈先麗;;76株肺炎克雷伯菌感染及耐藥性的分析[A];貴州省醫(yī)學會重癥醫(yī)學分會第三屆學術(shù)年會論文匯編[C];2008年

9 陳亞紅;姚婉貞;周慶濤;劉振英;張曉偉;;產(chǎn)超廣譜β內(nèi)酰胺酶大腸桿菌和肺炎克雷伯菌的耐藥性變化[A];中華醫(yī)學會第七次全國呼吸病學術(shù)會議暨學習班論文匯編[C];2006年

10 華杰;李艷霞;;肺炎克雷伯菌耐藥性監(jiān)測[A];2006中國微生物學會第九次全國會員代表大會暨學術(shù)年會論文摘要集[C];2006年

相關(guān)重要報紙文章 前2條

1 徐珍　編譯;超級病菌橫掃歐洲[N];醫(yī)藥經(jīng)濟報;2012年

2 陶慶春;用病原學檢測指導抗生素使用[N];健康報;2005年

相關(guān)博士學位論文 前10條

1 朱衛(wèi)民;肺炎克雷伯菌β—內(nèi)酰胺酶耐藥機制研究[D];重慶醫(yī)科大學;2002年

2 姚芬;肺炎克雷伯菌和假單胞菌耐藥機制研究[D];汕頭大學;2007年

3 魏澤慶;產(chǎn)KPC酶肺炎克雷伯菌分子流行和質(zhì)粒介導的KPC酶傳播機制研究[D];浙江大學;2013年

4 楊繼勇;產(chǎn)KPC肺炎克雷伯菌分子流行病學與分子特征研究[D];中國人民解放軍醫(yī)學院;2013年

5 齊艷;產(chǎn)KPC型碳青霉烯酶肺炎克雷伯菌分子分型及傳播機制研究[D];浙江大學;2012年

6 王京;引起肝膿腫的肺炎克雷伯菌毒力基因分析與分子流行特征研究[D];中國人民解放軍醫(yī)學院;2013年

7 賈艷;豬源肺炎克雷伯菌菌毛致病的分子基礎(chǔ)及其免疫相關(guān)抗原表位的篩選[D];吉林大學;2007年

8 趙麗娜;基層醫(yī)療機構(gòu)大腸埃希菌及肺炎克雷伯菌氟喹諾酮耐藥分子流行及遺傳特征研究[D];浙江大學;2015年

9 李君杰;產(chǎn)KPC酶肺炎克雷伯菌對磷霉素耐藥及傳播機制研究[D];浙江大學;2015年

10 李家斌;產(chǎn)ESBLs肺炎克雷伯菌和大腸埃希菌流行病學及分子生物學研究[D];浙江大學;2002年

相關(guān)碩士學位論文 前10條

1 楊永清;蘭州地區(qū)臨床分離大腸埃希菌與肺炎克雷伯菌產(chǎn)ESBLs的基因型及耐藥性研究[D];寧夏醫(yī)科大學;2015年

2 胡陽敏;住院患者抗菌藥物使用與肺炎克雷伯菌耐藥的相關(guān)性以及ICU患者CRKP感染的高危因素分析[D];浙江大學;2015年

3 王云;呼吸道合胞病毒合并肺炎克雷伯菌感染所致肺炎與TLR4-NF-κB信號通路關(guān)系的初步研究[D];安徽醫(yī)科大學;2015年

4 楊碩;宰殺肉雞中肺炎克雷伯菌耐藥基因的檢測和傳播分析[D];山東大學;2015年

5 崔琳;兒童醫(yī)院肺炎克雷伯菌流行狀況及耐藥性分析[D];大連醫(yī)科大學;2010年

6 唐小紅;2010-2013年我院肺炎克雷伯菌感染的臨床及耐藥分析[D];重慶醫(yī)科大學;2014年

7 冉艷;肺炎克雷伯菌熒光定量PCR檢測方法的建立和臨床應(yīng)用[D];浙江大學;2015年

8 李靜;肺炎克雷伯菌β-內(nèi)酰胺酶基因型研究[D];天津醫(yī)科大學;2010年

9 王云英;肺炎克雷伯菌生物膜對機體免疫功能的影響[D];重慶醫(yī)科大學;2010年

10 劉建輝;醫(yī)院感染肺炎克雷伯菌的脈沖場電泳分型研究[D];浙江大學;2002年

，

本文編號：2383694