本文選題：前列腺特異抗原 + 前列腺癌��； 參考：《分析化學(xué)》2016年08期

【摘要】：采用雜交瘤技術(shù)構(gòu)建抗前列腺特異抗原-α1-抗胰凝乳蛋白酶(Prostate specific antigen-α1-antichymotrypsin complex,PSA-ACT)單克隆抗體(單抗)細(xì)胞株,共獲得8株穩(wěn)定分泌PSA-ACT單抗的細(xì)胞株,純化后進(jìn)行免疫特性鑒定并做單抗配對。選擇其中一對單抗,采用辣根過氧化物酶(HRP)催化魯米諾(lumino)-H_2O_2化學(xué)發(fā)光體系,建立了測定人血清中PSA-ACT濃度的化學(xué)發(fā)光酶免疫分析方法(CLEIA)。對包被緩沖液、包被抗體濃度、酶標(biāo)抗體稀釋度、溫育時間、發(fā)光反應(yīng)時間和免疫反應(yīng)步驟等實驗參數(shù)進(jìn)行了優(yōu)化。在最佳實驗條件下,PSA-ACT濃度在5~40 ng/m L范圍內(nèi)線性關(guān)系良好(R~2=0.9943),檢出限為0.53 ng/m L,批內(nèi)相對標(biāo)準(zhǔn)偏差(RSD)為4.6%~6.6%,批間RSD為5.7%~8.0%,回收率為95.4%~104.2%,與游離前列腺特異性抗原F-PSA的交叉反應(yīng)率為0.6%。本方法簡單、穩(wěn)定、靈敏、快速,為開發(fā)檢測PSA-ACT的CLEIA試劑盒奠定了基礎(chǔ)。
[Abstract]:Hybridoma technique was used to construct prostate specific antigen- 偽 1-antichymotrypsin complex PSA-ACT monoclonal antibody cell lines. Eight cell lines secreting stable PSA-ACT monoclonal antibodies were obtained. A chemiluminescent enzyme immunoassay (CLEIA) for the determination of PSA-ACT in human serum was developed by using a pair of monoclonal antibodies and a chemiluminescence system of (lumino) / S _ 2O _ 2 catalyzed by horseradish peroxidase (HRP). The experimental parameters such as coating buffer concentration of coated antibody dilution of enzyme-labeled antibody incubation time luminescence reaction time and immunoreaction steps were optimized. Under the optimum experimental conditions, the concentration of PSA-ACT was linear in the range of 5o 40 ng/m / L (RPSA-ACT 0.9943), the detection limit was 0.53 ng/m / L, the relative standard deviation (RSD) was 4.6 ng/m / L, and the relative standard deviation (RSD) was 4.66.0.The recovery rate was 95.4104.22.The cross reaction rate with free prostate specific antigen F-PSA was 0.6m. The method is simple, stable, sensitive and rapid, which lays a foundation for the development of CLEIA kit for the detection of PSA-ACT.
【作者單位】： 昆明醫(yī)科大學(xué)附屬延安醫(yī)院核醫(yī)學(xué)科;昆明醫(yī)科大學(xué)第三附屬醫(yī)院核醫(yī)學(xué)科;
【基金】：云南省應(yīng)用基礎(chǔ)研究(昆醫(yī)聯(lián)合專項)項目(No.2014FB077)資助
【分類號】：R446.6

【相似文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 傅雷,王自正,王書奎,孫君江;游離與總前列腺特異抗原比值臨床應(yīng)用[J];中華檢驗醫(yī)學(xué)雜志;2000年01期

2 黃維嘉,魏明竟;血清前列腺特異抗原-0_1-蛋白酶抑制物復(fù)合物的測定[J];國外醫(yī)學(xué).臨床生物化學(xué)與檢驗學(xué)分冊;2000年06期

3 武建國;;前列腺特異抗原的幾個臨床應(yīng)用問題[J];臨床檢驗雜志;2006年01期

4 寧炎;;血清游離/總前列腺特異抗原在前列腺疾病診斷中的價值[J];國際檢驗醫(yī)學(xué)雜志;2008年08期

5 段建敏,陳一戌,秦大山,白淑芳,劉國棟,陳雪紅,王亦秋;前列腺特異抗原測定的臨床意義[J];臨床泌尿外科雜志;1994年S1期

6 黃學(xué)忠,武建國;前列腺特異抗原的檢測方法及應(yīng)用研究進(jìn)展[J];國外醫(yī)學(xué).臨床生物化學(xué)與檢驗學(xué)分冊;1996年06期

7 賈建成,石銀華,鄭勝香;放射免疫法檢測前列腺特異抗原的初評[J];寧夏醫(yī)學(xué)雜志;1997年05期

8 李衛(wèi)鵬;前列腺特異抗原研究進(jìn)展(文獻(xiàn)綜述)[J];放射免疫學(xué)雜志;2003年01期

9 莊嚴(yán),陳莉,李緒黎,賀松;深圳地區(qū)健康男性總前列腺特異性抗原水平的調(diào)查[J];中國誤診學(xué)雜志;2005年12期

10 趙敏;普芝;次卓嘎;;前列腺特異抗原檢測的臨床應(yīng)用[J];西藏醫(yī)藥雜志;2006年04期

相關(guān)會議論文 前2條

1 陳乃光;夏峰;樓映;陳祖榮;陳定妹;;前列腺特異抗原臨床應(yīng)用探討[A];第一屆全國中西醫(yī)結(jié)合男科學(xué)術(shù)會議論文匯編[C];2001年

2 楊國宗;朱培元;胡毓安;戈一峰;黃宇烽;;不育病人精漿前列腺特異抗原的檢測及意義[A];第二次全國中西醫(yī)結(jié)合男科學(xué)術(shù)會議論文集[C];2003年

相關(guān)重要報紙文章 前1條

1 身體周刊記者 屠俊;醫(yī)生不嘗試的治療[N];東方早報;2014年

，

本文編號：2093137