基于鈰元素的熒光側(cè)向液流免疫層析用于降鈣素原測(cè)定
本文關(guān)鍵詞: 鈰元素 側(cè)向液流免疫層析 降鈣素原 微球 床旁檢測(cè) 出處:《基因組學(xué)與應(yīng)用生物學(xué)》2016年05期 論文類型:期刊論文
【摘要】:基于鈰元素(Ce)的熒光側(cè)向液流免疫層析(lateral-flow immunoassays,LFIA)技術(shù),開發(fā)一種用時(shí)短、檢測(cè)限低的方法,定量測(cè)定降鈣素原(procalcitonin,PCT),以滿足臨床檢測(cè)和診斷的需求。經(jīng)反向微乳化、氨基修飾、包被Ce,合成Ce微球;其經(jīng)活化、洗滌,用PCT抗體標(biāo)記結(jié)合和封閉制備微球懸浮劑,固化液相、固定包被和質(zhì)控抗體、組裝和切割等步驟制備PCT試紙條,檢測(cè)PCT標(biāo)準(zhǔn)品;通過精密度、正確度、回收率、交叉反應(yīng)和熱穩(wěn)定實(shí)驗(yàn)分析該P(yáng)CT試紙條的臨床價(jià)值。實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示:用1%含量的Ce微球、100μg標(biāo)記抗體、Blockmaster TM CE510封閉劑制備的PCT試紙條,采用LFIA法檢測(cè)PCT,僅需4 min完成檢測(cè),大大縮短實(shí)驗(yàn)時(shí)間;檢測(cè)限達(dá)0.10μg/L;且無(wú)邊緣和鉤狀效應(yīng)、交叉反應(yīng);成本低、精密度和準(zhǔn)確度高、回收率佳、熱穩(wěn)定性好。因此,本實(shí)驗(yàn)基于Ce的LFIA法,成功研發(fā)了一種快速、靈敏的PCT床旁定量檢測(cè)。
[Abstract]:Based on cerium (Ce) fluorescence immunochromatographic lateral flow (lateral-flow immunoassays LFIA) technology, the development of a short time, the method has low detection limit, quantitative determination of procalcitonin (procalcitonin, PCT), in order to meet the needs of clinical examination and diagnosis. By reverse microemulsion, amino modification, package by Ce, the synthesis of Ce microspheres; the activation, washing, labeled with PCT antibody were combined and closed for preparation of microsphere suspension agent, curing liquid, coated and fixed control antibody, assembly and cutting steps of preparation of PCT strip, detection of PCT standard; through the precision, accuracy, recovery, cross the reaction and thermal stability test analysis of the clinical value of the PCT strip. The experimental results show that the Ce microspheres 1% content, 100 g labeled antibody, PCT Blockmaster TM CE510 sealant strip preparation, detected by LFIA PCT, only 4 min to complete the detection, shorten the experiment time limit of detection; It reaches 0.10 micron g/L, and has no edge and hook effect, cross reaction, low cost, high precision and accuracy, good recovery and good thermal stability. Therefore, based on the LFIA method of Ce, this experiment has developed a fast and sensitive PCT bedside quantitative detection.
【作者單位】: 中南大學(xué)湘雅醫(yī)學(xué)院醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)系;湖南省腫瘤醫(yī)院暨中南大學(xué)湘雅醫(yī)學(xué)院附屬腫瘤醫(yī)院;
【基金】:長(zhǎng)沙市科技局產(chǎn)學(xué)研金合作資金專項(xiàng)(K1308118-31)資助
【分類號(hào)】:R446.6
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