本文關(guān)鍵詞： 羅爾斯頓菌屬 細菌鑒定 藥物敏感實驗 多位點基因序列研究　出處：《中國人民解放軍醫(yī)學院》2015年碩士論文　論文類型：學位論文

【摘要】：1、目的：(1)建立基于PCR的細菌鑒定方法,為準確鑒定羅爾斯頓菌提供新的方法。(2)測定菌株的藥物敏感性,了解其耐藥表型,為臨床合理應用抗生素提供依據(jù)。(3)選擇利用6個基因位點進行分析,初步建立羅爾斯頓菌屬細菌的MLST體系,為其分型分析提供參考。(4)國內(nèi)首次報道一例羅爾斯頓菌屬中危險羅爾斯頓菌所致感染的病例。2、方法：(1)收集2008年1月至2013年12月我院經(jīng)VITEK 2細菌鑒定系統(tǒng)鑒定為皮氏羅爾斯頓菌的非重復菌株48株,以細菌特異PCR實驗進行重新鑒定,并以16S rDNA鑒定結(jié)果為標準,比較三者差異。(2)分別以K-B法及MIC法測定菌株的藥物敏感性,并通過Carba NP法檢測菌株中碳氫霉烯酶。(3)通過測定菌株6個基因位點各片段的核苷酸序列,對菌株進行多位點序列分型分析。(4)回顧性分析1例危險羅爾斯頓菌所致感染患者的臨床資料及病原學資料。3、結(jié)果：(1)經(jīng)VITEK 2細菌鑒定系統(tǒng)鑒定,48株細菌均為皮氏羅爾斯頓菌；經(jīng)細菌特異PCR實驗鑒定,上述48株細菌中,1株危險羅爾斯頓菌,8株解甘露醇羅爾斯頓菌,30株皮氏羅爾斯頓茵；經(jīng)16S rDNA鑒定,上述48株細菌中,1株危險羅爾斯頓菌,7株解甘露醇羅爾斯頓菌,34株皮氏羅爾斯頓菌,1株木糖氧化無色桿菌,2株洋蔥伯克霍爾德菌,3株嗜麥芽寡養(yǎng)單胞菌。(2)皮氏羅爾斯頓菌對β-內(nèi)酰胺類/β-內(nèi)酰胺酶、左氧氟沙星、米諾環(huán)素、甲氧芐氨嘧啶/磺胺甲嗯唑等抗生素敏感性較高,對氨曲南、美羅培南、氨基糖甙類、多粘菌素B、呋喃妥因等抗生素的耐藥率較高。解甘露醇羅爾斯頓菌一般對氨曲南、氨基糖甙類、多粘菌素B等高度耐藥,對環(huán)丙沙星、左氧氟沙星、甲氧芐氨嘧啶/磺胺甲嗯唑等一般均敏感,Carpa NP實驗檢測菌株中碳氫酶烯酶結(jié)果為陰性。(3)MLST分析顯示我院42株羅爾斯頓菌共包含18個ST序列型,其中ST9序列型最多,共22株,為優(yōu)勢型別,其次為ST2型和ST4型各2株,其余ST型均僅1株。UPGMA法進行聚類分析顯示42株羅爾斯頓菌屬細菌共分為2個群(A和B)和18個基因型,A群含8個基因型,共10株菌,其中4株經(jīng)16SrDNA鑒定為皮氏羅爾斯頓菌,6株為解甘露醇羅爾斯頓菌,B群含10個基因型,共32株菌,其中1株為解甘露醇羅爾斯頓菌,1株為危險羅爾斯頓菌,余均為皮氏羅爾斯頓菌。(4)一名93歲女性患者痰標本中發(fā)現(xiàn)危險羅爾斯頓菌,初始被錯誤鑒定為皮氏羅爾斯頓菌,藥敏提示菌株對β-內(nèi)酰胺類／β-內(nèi)酰胺酶、部分頭孢類類、喹諾酮類以及磺胺類敏感性較好,對氨曲南、呋喃要因、多粘菌素B以及氨基糖甙類抗生素耐藥,經(jīng)頭孢他啶、環(huán)丙沙星抗感染治療后好轉(zhuǎn)。4、結(jié)論：(1)利用細菌特異PCR實驗來鑒定羅爾斯頓菌屬中的臨床致病菌簡便、快捷、準確度和特異度較高。(2)皮氏羅爾斯頓菌菌株對β-內(nèi)酰胺類／β-內(nèi)酰胺酶抑制劑、左氧氟沙星、米諾環(huán)素、甲氧芐氨嘧射磺胺甲嗯唑等抗生素敏感性較高。解甘露醇羅爾斯頓菌菌株對對環(huán)丙沙星、左氧氟沙星、甲氧芐氨嘧對磺胺甲嗯唑等一般均敏感；羅爾斯頓菌株中可能存在碳氫酶烯酶外的其他機制介導耐碳青霉烯類抗生素菌株的耐藥性。(3)利用atpD、gltB、gyrB、lepA、phaC、recA6個基因位點可初步對羅爾斯頓菌屬細菌進行多位點序列分型研究。(4)臨床危險羅爾斯頓菌所引起的感染較少見,臨床癥狀無特異性,確診依賴于微生物學的準確鑒定,治療可結(jié)合藥敏實驗結(jié)果來選擇敏感抗生素。
[Abstract]:1 . Objective : ( 1 ) To establish a PCR - based method of bacterial identification to provide a new method for the accurate identification of Ralstonia . ( 4 ) A retrospective analysis of the clinical data and pathogenic information of 1 case of patients with infection caused by dangerous Ralstonia . The results were as follows : ( 1 ) The results were as follows : ( 1 ) The 48 strains were identified by VITEK 2 bacteria identification system . ( 3 ) The results showed that 42 strains of Ralstonia were divided into 2 groups ( A and B ) and 18 genotypes . ( 3 ) Using atpD , gltB , gyrB , lepA , phaC and recA6 gene loci , we can carry out a multi - site sequence typing on the bacteria of the genus Ralstonia .

【學位授予單位】：中國人民解放軍醫(yī)學院
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2015
【分類號】：R446.5

【共引文獻】

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1 Mingjun Li;Li Nan;Dake Xu;Guogang Ren;Ke Yang;;Antibacterial Performance of a Cu-bearing Stainless Steel against Microorganisms in Tap Water[J];Journal of Materials Science & Technology;2015年03期

2 Tsz Wai Ng;Guocheng Huang;Po Keung Wong;;Investigation of drinking water bacterial community through high-throughput sequencing[J];Journal of Environmental Sciences;2015年11期

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本文編號：1454541