微滴噴射玻璃化保存系統(tǒng)產(chǎn)生的微滴尺寸較小,在較低濃度的低溫保護(hù)劑條件下即可實(shí)現(xiàn)玻璃化。本文采用微滴噴射玻璃化保存系統(tǒng)對(duì)Hep G2細(xì)胞進(jìn)行玻璃化保存,研究保護(hù)劑加載過程、噴射過程、接收過程及玻璃化/復(fù)溫過程對(duì)細(xì)胞造成的損傷程度,并通過降低保護(hù)劑中Me₂SO濃度、添加適量海藻糖來優(yōu)化保護(hù)劑配方。結(jié)果表明,微滴噴射玻璃化保存各過程對(duì)細(xì)胞均有損傷,保護(hù)劑加載過程、噴射過程、玻璃化及復(fù)溫過程對(duì)細(xì)胞造成的損傷較大,薄片接收過程對(duì)細(xì)胞造成的損傷小。另外,隨著保護(hù)劑中Me₂SO濃度的降低,低溫保存后的細(xì)胞活性明顯降低;保護(hù)劑濃度相同時(shí),玻璃化保存效果較慢速冷凍效果好;適量的海藻糖能夠起到增強(qiáng)低溫保存效果的作用,過量則起到降低作用;以5%Me₂SO+0. 3 mol/L海藻糖作為低溫保護(hù)劑玻璃化保存細(xì)胞時(shí),細(xì)胞存活率達(dá)(92. 42±0. 95)%,24 h貼壁率達(dá)到(95. 64±1. 03)%,微滴噴射玻璃化效果最好。

【文章頁數(shù)】：7 頁

【文章目錄】：
1 材料與方法
    1.1 材料與設(shè)備
    1.2 微滴噴射玻璃化保存系統(tǒng)
    1.3 細(xì)胞冷凍方法
    1.4 細(xì)胞活性判斷方法
        1.4.1 臺(tái)盼藍(lán)染色計(jì)算細(xì)胞存活率
        1.4.2 24 h貼壁率
    1.5 微滴噴射玻璃化各過程的損傷分析
    1.6 低溫保護(hù)劑的優(yōu)化
2 結(jié)果與討論
    2.1 噴射各過程對(duì)細(xì)胞造成的損傷
    2.2 降低Me2SO濃度對(duì)細(xì)胞活性的影響
    2.3 添加海藻糖對(duì)細(xì)胞活性的影響
3 總結(jié)與展望



本文編號(hào)：3786606