【摘要】：目的研究大頭金蠅(Chrysomya megacephala)卵不同發(fā)育時(shí)間的形態(tài)變化和基因表達(dá)差異規(guī)律。方法從大頭金蠅成蟲產(chǎn)完卵后,取出卵塊,記時(shí)為0 h,每隔2 h取卵10枚,直至有幼蟲孵出,分別用體視顯微鏡和掃描電鏡觀察其不同發(fā)育時(shí)間的形態(tài)學(xué)變化。提取0、2、4、6和8 h等5個(gè)發(fā)育時(shí)間點(diǎn)的蠅卵RNA,應(yīng)用RT-PCR比較循環(huán)閾值(threshold cycle,CT值)法測定bicoid、slalom和幾丁質(zhì)合成酶(chitin synthase)基因相對(duì)表達(dá)水平,SPSS19.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件對(duì)CT值及時(shí)間進(jìn)行擬合直線方程、等比級(jí)數(shù)曲線方程和指數(shù)方程分析。結(jié)果體視顯微鏡下觀察,大頭金蠅卵產(chǎn)后0~4h形態(tài)學(xué)變化不明顯,6h有體節(jié)形成,8 h開始出現(xiàn)皺縮,9 h有幼蟲孵出;掃描電鏡下觀察,卵產(chǎn)后0~4 h時(shí)變化不明顯,卵孔一端略向外突出,卵孔周圍光滑,6 h后卵孔一端向內(nèi)凹陷,卵孔周圍有不規(guī)則突起形成,8 h時(shí)凹陷明顯,9 h已發(fā)育為幼蟲。大頭金蠅卵在不同發(fā)育時(shí)間bicoid、slalom和chitin synthase等3個(gè)基因的相對(duì)表達(dá)水平隨著時(shí)間變化呈一定的規(guī)律變化,相關(guān)回歸方程式3個(gè)基因CT值的差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。結(jié)論體視顯微鏡和掃描電鏡下大頭金蠅卵形態(tài)結(jié)構(gòu)隨時(shí)間改變而發(fā)生變化。大頭金蠅卵不同發(fā)育時(shí)間的bicoid、slalom和chitin synthase基因表達(dá)水平有差異。
[Abstract]:Objective to study the morphological changes and gene expression of (Chrysomya megacephala) eggs in Drosophila macrocephala. Methods the eggs were taken out from adults of Drosophila macrocephala at 0 h and 10 eggs were taken out every 2 hours until the larvae hatched. The morphological changes of the eggs at different developmental times were observed by stereomicroscopy and scanning electron microscope. The relative expression levels of bicoid,slalom and chitin synthase (chitin synthase) gene were determined by RT-PCR comparative circulation threshold (threshold cycle,CT) method. The CT value and time were fitted by SPSS19.0 software, and the linear equation, the equal-ratio series curve equation and the exponential equation were analyzed. Results under stereoscopic microscope, the morphological changes were not obvious at 0h, 6h, 8h, and 9h, respectively. Under scanning electron microscope, the changes were not obvious at 0h postpartum, the one end of egg foramina was slightly protruded out, and the circumference of egg foramen was smooth. After 6 h, one end of egg foramen was concave inward, irregular protuberance formed around egg foramen, and obvious depression was observed at 8 h. The larva has developed into larva in 9 h. The relative expression level of three genes (bicoid,slalom and chitin synthase) in the egg of Drosophila macrocephala changed regularly with time, and the CT values of the three genes in the regression equation were significantly different (P0.05). Conclusion the morphological structure of Drosophila macrocephala eggs changed with time under stereoscopic microscope and scanning electron microscope. The expression levels of bicoid,slalom and chitin synthase genes in Drosophila macrocephala eggs at different developmental times were different.
【作者單位】： 貴州省貴陽醫(yī)學(xué)院法醫(yī)學(xué)系/法醫(yī)司法鑒定中心;貴州省安順市公安局刑偵支隊(duì);
【基金】：2013年貴州省高校工程技術(shù)研究中心項(xiàng)目(黔科合KY字[2013]114號(hào)) 2012年貴州省教育廳產(chǎn)學(xué)研基地項(xiàng)目(黔教合KY字[2012]031號(hào)) 貴州省衛(wèi)生廳科學(xué)技術(shù)基金項(xiàng)目(WT2013-1) 貴陽醫(yī)學(xué)院院基金項(xiàng)目(院基金合同字第021號(hào))~~
【分類號(hào)】：D919

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本文編號(hào)：2425148