【摘要】：目的比較Chelex-100法、酚/氯仿法和二氧化硅膜法3種DNA提取法在污染嚴重混合斑分型中的應用效果。方法從日常案例中收集污染嚴重的混合斑25份,差異消化法分離精子后同時用Chelex-100法、酚/氯仿法和二氧化硅膜技術3種方法提取DNA,采用PCR-STR技術對D19S253、FGA和CSF1PO 3個基因座進行分型,Gel-Pro軟件處理電泳圖譜,SPSS軟件分析比較不同方法之間的差異。結(jié)果采用Chelex-100法提取DNA,25份檢材分型結(jié)果均未成功;采用酚/氯仿法,25份檢材中10份分型成功,3份檢材FGA和CSF1PO基因座可分型,4份檢材CSF1PO基因座可分型;采二氧化硅膜純化法,25份檢材均成功分型;酚/氯仿法和二氧化硅膜法兩種方法比較,結(jié)果存在顯著性差異(P0.05)。結(jié)論二氧化硅膜純化技術可以有效去除PCR抑制物,提取的DNA擴增效果明顯優(yōu)于Chelex-100法和酚/氯仿法,具有較高的應用價值。
[Abstract]:Objective to compare the application effect of Chelex-100 method, phenol / chloroform method and silica membrane method in the classification of seriously polluted mixed spot. Methods Twenty-five samples of seriously polluted mixed spots were collected from daily cases. Sperm were separated by differential digestion and Chelex-100 was used at the same time. DNA, was extracted by phenol / chloroform method and silica membrane technique. Three genotypes of D19S253FGA and CSF1PO were classified by PCR-STR technique. The electrophoretic patterns were processed by Gel-Pro software and the differences between different methods were analyzed and compared by SPSS software. Results the typing results of DNA,25 samples extracted by Chelex-100 method were not successful, 10 of 25 samples were successfully typed by phenol / chloroform method, 3 samples were genotyped by FGA and CSF1PO loci, and 4 samples by CSF1PO loci. Silica membrane purification method, 25 samples were successfully classified; phenol / chloroform method and silica membrane method were compared, the results showed significant difference (P0.05). Conclusion silica membrane purification technique can effectively remove PCR inhibitor, and the amplification effect of DNA extracted is better than that of Chelex-100 and phenol / chloroform method.
【作者單位】： 華中科技大學同濟醫(yī)學院法醫(yī)學系 河南科技大學法醫(yī)學院 華中科技大學同濟醫(yī)學院法醫(yī)學系
【分類號】：D919

【參考文獻】

相關期刊論文 前3條

1 陳慧,余純應,楊慶恩,楊榮芝;武漢地區(qū)STRFGA座位的群體分布調(diào)查[J];法醫(yī)學雜志;1999年01期

2 陳慧,余純應,楊榮芝,楊慶恩;武漢地區(qū)漢族人群CSF1PO座位多態(tài)性分析[J];法醫(yī)學雜志;1999年02期

3 黃代新,楊慶恩;STR位點D19S253和D8S1179的多態(tài)性研究[J];中華醫(yī)學遺傳學雜志;1998年04期

【共引文獻】

相關期刊論文 前10條

1 賀桂芳,馬旭,邢淑敏,陳漢平;STR-PCR檢測孕婦外周血漿中胎兒DNA基因型的初步研究[J];中國婦產(chǎn)科臨床;2001年06期

2 李志強,楊慶恩,余純應,陳慧;武漢漢族人群STR基因座D3S1358、D13S317、D12S391的多態(tài)性研究[J];法律與醫(yī)學雜志;2000年02期

3 馬衛(wèi)東;兩例皮膚上咬痕的DNA鑒定[J];法律與醫(yī)學雜志;2001年03期

4 馬衛(wèi)東;無精斑證據(jù)性犯罪案件其他物證DNA檢驗(附6例報告)[J];法律與醫(yī)學雜志;2001年04期

5 朱少建,劉超,李發(fā)貴,汪萍;壯族人群3個STR基因座基因頻率分布及其法醫(yī)學應用[J];中國法醫(yī)學雜志;1999年01期

6 馬衛(wèi)東;手術后腹腔遺留紗布塊的DNA檢驗1例[J];中國法醫(yī)學雜志;2000年02期

7 馬衛(wèi)東;殺豬刀上人血痕的DNA檢驗1例[J];法醫(yī)學雜志;2000年04期

8 聶勝潔,景強,李建京,許冰瑩;PCR-STR技術在交通事故鑒定中的應用[J];法醫(yī)學雜志;2001年01期

9 薛小琦,莫耀南,艾紅偉;STR FGA基因座變異1例[J];法醫(yī)學雜志;2001年02期

10 樓迪棟,郭兆明,王旭,艾紅偉,黃華春,余純應;兩組引物對無毛囊毛根的PCR-STR分型[J];法醫(yī)學雜志;2005年04期

【二級參考文獻】

相關期刊論文 前1條

1 鄒浪萍,楊燕,鄒蘋,申濱,趙麗萍,李德林;CSF1PO,TPOX和TH01基因座復合擴增及其在苗族人群中的基因頻率分布[J];中國法醫(yī)學雜志;1997年03期

【相似文獻】

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1 張杰;賀仲;李素平;;微量PCR反應體系在兩種試劑盒中的應用[J];中國法醫(yī)學雜志;2006年02期

2 余紅麗;張彥軍;;觸摸遺留人體生物檢材DNA分型檢驗2例[J];中國法醫(yī)學雜志;2010年03期

3 孫大鵬;王e，

本文編號：2280718